凝膠色譜法的分離過程

發(fā)布時間：2025-09-04 | 來源：互聯(lián)網(wǎng)轉(zhuǎn)載和整理

凝膠色譜法(Gel Chromatography)是一種常用的分離和分析化合物的方法，它基于不同物質(zhì)在凝膠中的親疏水性差異。

以下是凝膠色譜法的分離過程：

1. 樣品制備：將待分析的混合物溶解在適當?shù)娜軇┲校纬梢粋€均勻的溶液。然后將該溶液過濾，去除其中的固體顆?；螂s質(zhì)。

2. 涂布：將過濾后的溶液均勻地涂布在硅膠或其他適合的凝膠基質(zhì)上。通常會采用薄層涂布法，即將一層凝膠放在一個平臺上，再在其上涂布一層溶液。這樣可以保證樣品與凝膠之間的接觸面積最大化。

3. 靜置：將涂好凝膠的平臺放入冰箱中靜置一段時間，使凝膠中的孔隙完全充滿水分。這個過程稱為“固化”。

4. 洗滌：用水或其他適當?shù)娜軇┹p輕洗滌凝膠表面，以去除未被吸附的雜質(zhì)。然后用去離子水或其他適當?shù)木彌_液洗滌數(shù)次，直到洗滌液的pH值與樣品相近為止。

5. 加載：將經(jīng)過洗滌的凝膠放入柱子中，并加入適量的流動相。通常使用的流動相是一種極性較強的有機溶劑，如甲醇-水或乙腈-水等。

6. 洗脫：將柱子連接到檢測設(shè)備上，開始進行洗脫操作。隨著流動相不斷地通過柱子，樣品中的化合物會沿著凝膠孔隙向外移動，最終被洗脫出來。

7. 檢測：將洗脫出的化合物收集起來，進行進一步的分析和檢測。常用的檢測方法包括高效液相色譜(HPLC)、氣相色譜(GC)等。因為凝膠色譜法具有分離效果好、靈敏度高、操作簡便等優(yōu)點，所以在生物化學、藥物分析、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。