退火溫度一般是多少？

發(fā)布時(shí)間：2025-08-20 | 來源：互聯(lián)網(wǎng)轉(zhuǎn)載和整理

唉，這種題就是中國特色，完全理論脫離實(shí)際。pcr退火溫度是一個(gè)范圍，一般是50度到65度，或者到70度做兩步法pcr。其中，模板的gc含量、模板的組成（單一模板還是cdna還是全基因組dna還是別的什么）等等條件都會影響tm值。沒有一個(gè)確定的說是多少比較好，都是具體情況具體分析。有的時(shí)候引物設(shè)計(jì)回來，還要做溫度梯度測驗(yàn)，設(shè)計(jì)的tm不一定就是最適合的tm。不得不說這題直接問一個(gè)數(shù)，純屬是閉門造車，一點(diǎn)實(shí)驗(yàn)經(jīng)歷都沒有只憑空想，答對了也沒有得到任何有用的知識。 好了，如果非要說一個(gè)數(shù)的話，那么習(xí)慣上是55度左右。選項(xiàng)中我更傾向于56度的答案。50度還是偏低，對于稍微復(fù)雜的模板來說，非特異性擴(kuò)增的可能是b，生物必修三的玩意！