PCR反應(yīng)原理及應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2025-09-25 | 來(lái)源:互聯(lián)網(wǎng)轉(zhuǎn)載和整理
PCR技術(shù)又稱聚合酶鏈反應(yīng)(PolymeraseChainReaction)技術(shù),是一種在體外(試管、切片…)擴(kuò)增核酸的技術(shù)。該技術(shù)模擬體內(nèi)天然DNA的復(fù)制過程。其基本原理是在模板、引物、4種dNTP和賴熱DNA聚合酶存在的條件下,特異擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA區(qū)段的酶促合成反應(yīng)。每一循環(huán)包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三步反應(yīng)。每一循環(huán)的產(chǎn)物作為下一個(gè)循環(huán)的模板,如此循環(huán)30次,介于兩個(gè)引物之間的新生DN**段理論上達(dá)到230拷貝(約為109個(gè)分子)。PCR技術(shù)的特異性取決于引物與模板結(jié)合的特異性。
PCR技術(shù)廣泛的應(yīng)用于遺傳性疾病的診斷,傳染病病原體的檢測(cè)、法醫(yī)學(xué),考古學(xué)和分子生物學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。